Avaliação microbiológica da superfície dos implantes ortopédicos metálicos usados para fixar fraturas ósseas / Microbiological analysis of the surface of metal orthopedic implants used to fix bone fractures

A maioria dos casos de fraturas ósseas é utilizada nas cirurgias, implantes ortopédicos de osteossíntese (placa-parafuso e parafusos) e a infecção associada ao implante está relacionada com crescimento de microrganismos em biofilme. O objetivo deste estudo foi identificar os microrganismos recuperados de implantes de osteossíntese usados para fixação de fratura óssea, avaliar a viabilidade celular, a capacidade de aderência dos estafilococos e, determinar o perfil de sensibilidade/resistência aos antimicrobianos. Após a remoção cirúrgica, os conjuntos metálicos de aço inoxidável austenítico ASTM F138/F139 ou ISO NBR 5832-1/9 foram enviados ao Laboratório de Microbiologia Clínica, lavados em solução tampão e submetidos ao banho ultrassônico em 40±2 kHz por 5 minutos. O fluido sonicado foi semeado em meios de cultura e a viabilidade celular foi avaliada por meio de marcador fluorescente. A produção de polissacarídeo extracelular por Staphylococcus spp. foi averiguada por meio do teste de aderência em placa de poliestireno. O perfil de sensibilidade/resistência foi determinado por meio de técnica do disco difusão. As bactérias mais isoladas incluíram Staphylococcus coagulase-negativa resistente à eritromicina, oxacilina e clindamicina. Em menor freqüência, Pseudomonas aeruginosa resistente à sulfametoxazol/trimetoprim e ampicilina; Acinetobacter baumannii resistente à ceftazidima; Enterobacter cloacae resistente à cefalotina, cefoxitina, cefazolina, levofloxacina, ciprofloxacina; Bacillus spp. e Candida tropicalis. A observação ao microscópio de fluorescência demonstrou agrupamentos celulares vivos envoltos em substância transparente. O teste de aderência dos Staphylococcus coagulase-negativa à placa de poliestireno mostrou que estes microrganismos são produtores de polissacarídeo extracelular. Em conclusão, os conjuntos metálicos foram colonizados por bactérias relacionadas à infecção de implantes ortopédicos, os quais apresentaram resistência múltipla aos antimicrobianos.

In the majority of cases of bone fracture requiring surgery, orthopedic implants (screw-plate and screw) are used for osteosynthesis and the infections associated with such implants are due to the growth of microorganisms in biofilms. The objective of this study was to identify microorganisms recovered from osteosynthesis implants used to fix bone fractures, to assess the viability of the cells and the ability of staphylococci to adhere to a substrate and to determine their sensitivity/resistance to antimicrobials. After surgical removal, the metal parts of austenitic stainless steel (ASTM F138/F139 or ISO NBR 5832-1/9) were transported to the Laboratory of Clinical Microbiology, washed in buffer and subjected to ultrasonic bath at 40±2 kHz for 5 minutes. The sonicated fluid was used to seed solid culture media and cell viability was assessed under the microscope by with the aid of a fluorescent marker. The production of extracellular polysaccharide by Staphylococcus spp. was investigated by means of adhesion to a polystyrene plate. The profile of susceptibility to antimicrobials was determined by the disk diffusion assay. The most frequently isolated bacteria included coagulase-negative Staphylococcus resistant to erythromycin, clindamycin and oxacillin. Less frequent were Pseudomonas aeruginosa resistant to trimethoprim/sulfamethoxazole and ampicillin, Acinetobacter baumannii resistant to ceftazidime, Enterobacter cloacae resistant to cephalothin, cefoxitin, cefazolin, levofloxacin and ciprofloxacin, Bacillus spp. and Candida tropicalis. The observation of slides by fluorescence microscope showed clusters of living cells embedded in a transparent matrix. The test for adherence of coagulase-negative Staphylococcus to a polystyrene plate showed that these microorganisms produce extracellular polysaccharide. In conclusion, the metal parts were colonized by bacteria related to orthopedic implant infection, which were resistant to multiple antibiotics.

Activity of disinfectants against foodborne pathogens in suspension and adhered to stainless steel surfaces

The purpose of this study was to investigate and compare the efficacy of various disinfectants on planktonic cells and biofilm cells of Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Numbers of viable biofilm cells decreased after treatment with all tested disinfectants (iodine, biguanide, quaternary ammonium compounds, peracetic acid and sodium hypochlorite). Sodium hypochlorite was the most effective disinfectant against biofilm cells, while biguanide was the least effective. Scanning electron microscopy observations revealed that cells adhered on stainless steel surface after treatment with the disinfectants. No viable planktonic cells were observed after treatment with the same disinfectants. Based on our findings, we concluded that biofilm cells might be more resistant to disinfectants than plancktonic cells.

Formação de biofilme cristalinode Proteus mirabilis em cateterurológico / Formation of crystalline biofilm of Proteus mirabilis in urological catheter

O cateter uretral de longa permanência tem papel de destaque para pacientes com retenção urinária, com obstrução debexiga, com danos neurológicos e outras doenças. A urina contém sais minerais, que em pH alcalino se precipitam,cristalizam-se e bloqueiam o cateter urológico. A cristalização dos componentes iônicos da urina ocorre em presença de urease, enzima produzida por Proteus mirabilis. Esta bactéria tem a capacidade de aderir a superfícies inanimadas e formar biofilme. O objetivo deste estudo foi observar a formação de biofilme cristalino na superfície luminal de cateter urológicode látex siliconizado, por meio de microscópio eletrônico de varredura, após a canalização de urina artificial infectada com Proteus mirabilis. O experimento foi realizado in vitro,em sistema de fluxo dinâmico. A urina artificial, composta de sais de cálcio, magnésio, fosfatos, uréia e albumina deovo, foi infectada com Proteus mirabilis ATCC 25933. O fluxo da urina canalizada foi interrompido após a cristalização dos componentes iônicos. A cristalização foi observada após a alcalinização da urina. A microscopia eletrônica de varredura demonstrou a presença de cristais e morfologiastípicas de bacilos embutidos em massa amorfa. O presente estudo mostrou que a incrustação pode limitar o uso decateter urológico de longa permanência.

The indwelling urethral catheter has an important role for patients with urinary retention, bladder obstruction, neurological damage and other diseases. Urine contains minerals which precipitate in alkaline pH, crystallize and block the urological catheter. Thecrystallization of the ionic components of urine occurs in the presence of urease, an enzyme produced by Proteus mirabilis. This bacterium adheres to inanimate surfaces and forms biofilms. The aim of this study was to investigate the formation of crystalline biofilm on the luminal surface of siliconized latex catheters by means of scanning electron microscope, after channeling artificialurine infected with Proteus mirabilis. The experiment was performed in vitro using a dynamic flow system. The artificial urine compounds were salts of calcium, magnesium, phosphates, urea and egg albumin, and it was infected with Proteus mirabilis ATCC 25933. The urine flow was stopped after crystallization of the ionic components. Crystallization was observed afteralkalinization of urine. Scanning electron microscopy showed the presence of crystals and morphologies typical of bacilli embedded in an amorphous mass on the internal lumen of the catheter. Thepresent study showed that catheter encrustation may limit the use of long-term indwelling catheter.

Biofilme detectado em ponta de cateter venoso central por cultura usando método quantitativo / Biofilm detection on central venous catheter using a quantitative culture method

O cateter venoso central é um instrumento médico muito usado no monitoramento de pacientes em estado crítico. O uso destes cateteres expõe o paciente ao risco de infecções locais e sistêmicas. O objetivo deste estudo foi detectar a presença de microrganismosque colonizam cateteres venosos centrais usando método quantitativo de cultura. No período de um ano foram analisadas 118 pontas de cateter venoso central e 42 amostras de sangue de veia periférica colhidas de 100 pacientes internados em unidade deterapia intensiva de um hospital (idade média de 57,8±0,3). De um segmento de 2,0cm foi realizada uma cultura quantitativa usando a água Mili-Q que lavou a superfície interna do cateter, após agitação em vortex. De uma diluição 1/10, uma alíquota de 100μl foi semeada em placas de ágar sangue. As colônias foram relatadas como UFC/ml. Este método requer crescimento ≥103 UFC/ml para mostrar que o cateter esta colonizado. Os dados obtidos mostraram que 28,8% pontas estavam colonizadas. Foram isolados 33 cepas microbianasGram-positivas predominando S. aureus (30,7%), S. epidermidis (7,7%) e C. albicans (1,9%). Dezenove Gram-negativas, das quais A. baumannii (9,7%), E. aerogenes (5,8%), P. aeruginosa (3,9%) e S. maltophilia (3,9%) foram isolados. Das 42 culturas de sangue, quatro foram positivas e duas mostraram S. aureus, uma S. maltophilia e uma C. freundii. O perfil de suscetilidade de S. aureus mostrou múltipla resistência antimicrobiana aos aminoglicosídeos, cloranfenicol, lincosamidas, macrolídeos, penicilinas, quinolonas

Uso do teste com cloridato de trifenil tetrazólio (CTT) para detecção de bacteriúria sintomática e assintomática / Use of the triphenil tetrazolium chloride (TTC) test to detect symptomatic and asymptomatic bacteriuria

A infecção do trato urinário é geralmente definida como a presença de 10 5 ou mais UFC/mL de urina, obtida sem contaminação, na presença ou não de sintomatologia. É um grande problema clínico, especialmente entre as mulheres adultas. Usando métodos convencionais, o diagnóstico laboratorial dessas infecções é caro, consome muito tempo e é trabalhoso. Há necessidade de se obter um teste simples capaz de detectar números significantes de bactérias na urina. Com este objetivo, pretendeu-se reavaliar o teste com cloridrato de trifenil tetrazólio (CTT). Os resultados mostraram que o teste apresentou 84,3 de sensibilidade, 96,5...

Stpahylococcus aureus biofilms on central venous haemodialysis catheters

As infecções devido a biofilmes bacterianos são comuns em pacientes sob tratamento em hemodiálise. Neste estudo, 16 pacientes (7 homens, 9 mulheres, de 22 a 81 anos, média 50 anos de idade), com um total de 25 cateteres de hemodiálise (3 de triplo-lúmen e 22 de duplo-lúmen) de poliuretano inseridos em veia subclávia foram estudados. Os cateteres permaneceram no local de 3 a 91 dias (média de 47 dias). Os cateteres foram removidos devido ao: mau funcionamento (44%), suspeita de infecção relacionada ao cateter (20%), viabilidade de um acesso permanente (16%), remoção acidental (12%), sinais e sintomas de infecção no local da inserção do cateter (4%) e contaminação exógena (4%). Culturas positivas de ponta foram observadas em sete cateteres (28%), concomitantemente com três culturas positivas de sangue. Das culturas de sangue foram identificados Staphylococcus aureus (12%) e de uma das conexões foi isolado S. aureus. Biofilmes foram observados sobre todas as pontas de cateteres. Os S. aureus isolados do sangue e cateter (ponta e conexão) eram resistentes a pencilina e sensíveis a azitromicina, ciprofloxacina, clindamicina, cloranfenicol, gentamicina, oxacilina, rifampicina, sulfametoxazole, tetraciclina e vancomicina. As cepas de S. aureus isoladas de sangue, ponta de cateter e conexão foram consideradas idênticas devido à coincidência do perfil de sensibilidade. E similaridade genética, avaliada por meio de ribotipagem.

Detection of mixed microbial biofilms on central venous catheters removed from Intensive care Unit Patients

Cateteres venosos centrais inseridos em pacientes internados em unidade de terapia intensiva foram avaliados por métodos microbiológicos (cultura semi-quantitativa) e microscopia eletrônica de varredura a fim de detectar adesão microbiana e correlacionar com a cultura de sangue. Durante o período de estudo, foram avaliados 59 pacientes com cateter venoso central. A idade dos pacientes, sexo, sítio de insercão e tempo de permanência do cateter foram anotados. O cateter era de poliuretano não tunelizado e de único lúmen. O sangue para cultura foi coletado no momento da remocão do cateter. De 63 pontas de cateteres, 30 (47,6%) foram colonizadas e a infeccão encontrada em 5 (23,8%) cateteres. A infeccão foi mais prevalente em 26 pacientes (41,3%) com cateteres inseridos em veia subclávia do que nos 3 (3,2%) inseridos em veia jugular. A infeccão foi observada com mais freqüência em cateteres com tempo de permanência maior do que sete dias. Os microrganismos isolados incluíram 32 estafilococos coagulase-negativa (29,7%), 61 bactérias Gram-negativas (52,9%), 9 estafilcocos coagulase-positiva (8,3%) e 3 leveduras (2,7%). Como agentes causais de infeccões em unidade de terapia intensiva foram isolados E. aerogenes, P. aeruginosa, A. baumannii. Os antimicrobianos com maior atividade in vitro contra as bactérias Gram-negativas foram o imipenem e contra as Gram-positivas vancomicina, cefepime, penicilina, rifampicina e tetraciclina. As análises por microscopia eletrônica de varredura revelaram biofilmes sobre a superfície de todos os cateteres examinados.

Uso do método de cultura semi-quantitativa para estudo de bacteriemia relacionada ao cateter venoso central utilizado por pacientes em hemodiálise / Use of semiquantitative culture method to study bacteremia with central venous catheter related in hemodialysis patients

As infecções são as principais complicações resultantes do uso de cateter venoso central. Nesta pesquisa 25 pontas de cateter venoso central retiradas de veia subclávia de 16 pacientes ambulatoriais em tratamento de hemodiálise foram analisadas por cultura semi-quantitativa. Hemoculturas foram realizadas pelo sistema Bactec 9050. Os resultados obtidos por cultura semi-quantitativa mostraram que 10(40%) das pontas foram colonizadas (> 15 UFC) pelos seguintes microrganismos 3 (30%) Staphylococcus aureus, 2 (20%) Staphylococcus warneri, 1 (10%), Staphylococcus epidermidis, 1 (10%), Stenotrophomonas maltophilia e 3 (30%) bacilos difteróides. Das culturas de sangue foram isolados microrganismos identificados como Staphylococcus aureus.A bacteriemia foi observada em 12% dos pacientes e 40% das pontas dos cateteres estudados estavam colonizados.

Adesão de protozoários à superfície de dispositivos intra-uterinos / Protozoan adhesion on intra uterine device (IUD)surface

Os dispositivos intra-uterinos (DIU) são usados por aproximadamente 100 milhões de mulheres no mundo todo. O DIU não é prescrito para mulheres com predisposição à doença pélvica inflamatória que normalmente é causada pelas doenças sexualmente transmissíveis (DSTs) não tratadas. A tricomoníase, uma das três principais infecções vaginais, é causada por um protozoário flagelado, Trichomonas vaginalis, transmitido por contato sexual, e mesmo as mulheres assintomáticas são capazes de transmiti-lo. O objetivo deste trabalho foi verificar por microscopia eletrônica de varredura a adesão deste protozoário às superfícies metálica e plástica do DIU. Fragmentos do DIU foram colocados em meio de Diamond contendo T. vaginalis e, após 3 dias de incubação a 37ºC, retirados e convenientemente tratados para observação em microscópio eletrônico de varredura. A leitura revelou os protozoários aderidos às superfícies plástica e metálica do dispositivo. Embora o DIU não esteja associado diretamente com a alta incidência de doença pélvica inflamatória, poderia tornar-se reservatório de organismos potencialmente infecciosos.

Chemical and microbiological evaluation of the internal surfaces of aluminum tubes both unlined and lined with epoxi resin by means of the stereoscope and scanning electron microscope

The internal surfaces of aluminum tubes, both unlined with epoxy resin, which are used for packaged medicines such as creams, ointments, gels, etc., were evaluated chemically, and microbiologically with regard to microorganism adherence. Proof of porosity of the unlined aluminum surface and lined with epoxy resin, and the resistance to removal of the resin were observed using a scanning electron microscope and a stereoscope, with a digitalized image system. to evaluate the microorganisms adherence to the aluminum surface, unlined and lined with epoxy resin, sterilized disks (10mm in diameter) were immersed in Mueller Hinton Broth and placed in tubes of polypropylene with screw caps. The liquid culture medium was then inoculated with suspensions (10(9)CFU/ml) of the following microorganisms: Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Acinetobacter Iwoffii and Candida albicans and incubated at 37ºC under constant agitation (100rpm) for 12 days. The culture broth was changed every 3 days, after which the disks were removed, and observed under the scanning electrn microscope. Microscopic observations revealed adherence of the microorganisms and biofilm on the aluminum surfaces both unlined and lined with epoxy resin.

Candidíase vulvovaginal com episódios de repetiçäo: epidemiologia e biotipagem de isolados de Candida albicans / Recurrent vulvovaginal candidiasis: biotyping and epidemiology of Candida albicans isolates

Na presente pesquisa, os resultados das avaliaçöes microbiológicas das secreçöes vaginais para presença de leveduras por exame a fresco/coloraçäo de Gram e cultura foram positivos, respectivamente em 69,4 por cento e 87,1 por cento. Cento e nove isolados de Candida sp foram recuperados de secreçöes vaginais, cavidade bucal, fezes e urina de 29 pacientes com candidíase vulvovaginal em vários episódios de repetiçäo. Foram identificados 86,2 por cento como C. albicans, 3,7 por cento com C. glabrata, 3,7 por cento com C. guilliermondi e 6,4 por cento como C. famata. O biótipo 177 foi mais freqüente nas secreçöes vaginais (46,8 por cento) nas fezes (53,8 por cento), na urina (50 por cento) e cavidade bucal (43,7 por cento). Pelo sistema killer foram diferenciados seis tipos de C. albicans com predominância do biótipo 888 em 87,2 por cento das amostras de secreçöes vaginais, 100 por cento em fezes, 88,9 por cento em urina e 68,7 por cento da cavidade bucal. Todos isolados de Candida albicans pertenciam ao sorogrupo A.

Animais domésticos como reservatórios de espécies termófilas de Campylobacter / Domestic animals as reservoirs of termophylic species of Campylobacter

O isolamento de espécies termófilas de Campylobacter das fezes de cães e vísceras de frangos foi observado em caldo Brucella (DIFCO) enriquecido com sangue de carneiro e mistura dos antibióticos (vancomicina, trimetoprin, polimixina B, anfotericina e cefalotina - CEFAR) como proposto por Blazer et al (1979). A análise foi feita em 132 culturas de materiais biológicos de cães com 8,3% de positividade e 212 de frangos com 62,2% de positividade. As espécies termófilas isoladas foram classificadas como Campylobacter jejuni, biotipo 1 e C. lari. As cepas de C. jejuni são sensíveis ao ácido nalidíxico (disco 30ug) e resistentes à cefalotina (disco 30ug). O C. lari é resistente ao ácido nalidixico e cefalotina (disco 30ug. Ambas as espécies desenvolvem-se bem a 37 e 43 graus C, mas não a 25 graus C. As espécies termófilas de Campylobacter atuam como patógenos entéricos.

Sorologia para banco de sangue: um dado de morbidade populacional? / Serology for blood blanks: data on population morbidity?

Com o aparecimento e o crescente número de casos de AIDS e a facilidade da transmissäo pelo sangue, os órgäos de Saúde Pública passaram a se preocupar com o problema e a exigir um screening sorológico em todos os doadores, além da verificaçäo do cumprimento das normas vigentes pelos Bancos de Sangue. O laboratório de Análises Clínicas "Prof. Antonio Longo" (LACAL), a partir de março de 1988, em convênio com a Secretaria da Saúde, através do ERSA 19, faz o rastreamento dos sangues dos doadores da Regional de Araraquara. Assim até junho de 1990 atendeu 6.804 doadores para verificaçäo apenas da presença do HIV com uma soropositividade de 0,30 por cento. O screening sorológico em 10.759 doadores revelou uma soropositividade de 1,40 por cento para Doença de Chagas, 2,63 por cento para Sífilis, 2,28 por cento para Hepatite B e 0,23 por cento para HIV. Foram bloqueados 6,45 por cento dos sangues, sendo que 13 doadores eram portadores de pelo menos duas morbidades. Esses dados podem refletir as condiçöes epidemiológicas de morbidade da Regional

Estreptococos beta-hemolíticos e níveis de antiestreptolisina "O" em escolares do 1§ grau da regiäo do Vale do Ribeira - SP / Beta hemolytics streptococci and levels of antiestreptolysin-O in schoolchildren from the fifth to ninth grade living in the Vale do Ribeira - Säo Paulo

Realizou-se a pesquisa de Estreptococos beta-hemolíticos, com material das fossas nasais e orofaringeano e dos níveis séricos de antiestreptolisina "O" (ASO), em escolares da zona urbana e rural de dois municípios da regiäo do Vale do Ribeira, SP. Examinou-se 588 escolares, encontrando-se 99 (16,8 por cento) portadores de Estreptococos beta-hemolíticos, assim distribuídos: 92 (92,9 por cento) do grupo A; 5 (5,1 por cento) do grupo G e 2 (2,0 por cento) do grupo C. No município A, distante do mar e com maior atençäo à saúde do menor, encontrou-se 24,2 por cento de Estreptococos beta-hemolíticos, enquanto no B, próximo ao mar, 75,8 por cento. Quanto aos níveis séricos, observou-se títulos considerados como indicativos de risco para Doença Reumática em número maior (45,6 por cento) para o Município B e 38,4 por cento para o Município A. Näo houve diferenciaçäo entre escolares de zona urbana e rural